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日本微小循环系复活剂怎么样

发布时间: 2023-01-24 14:25:10

① 怎么用游泳池消毒剂

河南金瑞水处理设备有限公司

游泳池水消毒剂的选择
消毒剂的选择应符合下列要求: 并有持续杀菌的功能; (1)不造成水和环境污染,不改变池水水质; (2)对人体无刺激或刺激性很小; (3)对建筑结构、设备和管道腐蚀小。
常用泳池消毒方法
一、纯化学药剂消毒法
投加化学消毒药剂法,通常是氯系消毒剂,常用氯系消毒剂有: (1)液氯 (2)次氯酸钙(漂白粉) (3)次氯酸钠(高效漂白粉、漂水) (4)二氯异氰尿酸钠(优氯净) (5)三氯异氰尿酸(强氯精) (6)溴氯海因(溴片) (7)二氧化氯
(1)液氯
优点:含有100%的有效氯,杀菌力强,并有较强的持续杀菌能力和除藻除臭除味的能力。应用广泛,技术工艺比较成熟,消毒系统投资和运行费用价廉,常用于自来水厂消毒。
不足:一般剂量对病毒、病原虫等无效,不能氧化一般的杀虫剂等复杂化合物,受PH影响大与某些有机物反应生成难闻的氯臭味。液氯作为消毒剂,对人体和环境造成的二次污染也很明显,氯系消毒剂本身与副产物对人体健康有损害。其使用危险,需要特别的安全装备,液氯在储存和运输过程中都应有专业的安全措施。加入游泳池后,其酸性特别强。需要加大量的碱调节pH值,所以,液氯在现在的游泳池中已很少使用。
(2)漂白粉
优点:应用最广,其主要成分为次氯酸钙[Ca(OCl)2],含有效氯25%一30%,次氯酸钙是一种普遍使用的游泳池消毒剂,有效成分次氯酸可渗入细胞内,氧化细胞酶的硫氢基因,破坏细胞代谢。可以应用在不同水质条件的水中,杀菌效果良好。酸性环境中其杀菌力强而迅速,高浓度能杀死芽胞。
不足:性质不稳定,可被光、热、潮湿及CO2所分解,故应密闭保存于阴暗干燥处,时间不超过1年。因其有腐蚀及漂白作用,故不宜用于金属器械及有色纺织物。如其存放太久,应按实际有效氯含量配制。并且漂白粉反应后有残渣,堵塞管道,影响水质,现逐步被淘汰。
(3)次氯酸钠
[NaOCl]别名高效漂白粉。纯品为白色粉末,通常为灰绿色结晶,在空气中不稳定。次氯酸钠有氯的气味,能与水混溶.溶液呈碱性.乳状原液的pH值高达12,随水溶液稀释度增加,pH值可降至7~9。性不稳定,遇热分解加速。对物品有漂白与腐蚀作用。
优点:其有效氯含量一般在10%—12%,比液氯的危险程度低,消毒效果良好。
不足:漂水含氯极不稳定,其有效氯会随环境、温度、湿度、光线及存放时间等因素的影响而逐渐下降,由于其衰减特别快,现场不能长期存放,并具有腐蚀性,所以储存和操作很困难。对设备有很高的要求,设备的日常维护也很困难。次氯酸钠会极高地增加池水的pH值,需要加大量的酸调节。
(4)二氯异氰尿酸钠
优点:二氯异氰尿酸钠又名优氯净,分子式: (C3C12N3O3)Na,简称SDIC, 为应用较广的有机氯消毒剂,含有效氯60%一64.5%,具有高效、广谱、稳定、溶解度高、毒性低等优点。水溶液可用于喷洒、浸泡、接抹,亦可用于粉直接消毒污染物、处理粪便等排泄物,用法同漂白粉。与多聚甲醛干粉混合点燃,其气体可用熏蒸消毒.也可与92号混凝剂(羟基氯化铝为基础加铁粉、硫酸、双氧水等合成)以1: 4混合成“遇水清”,可作饮水消毒用。并可与硝酸钠配制成各种消毒洗涤液,如涤静美、优氯净等。能够迅速杀灭病毒、细菌及其芽抱,能有效预防肝炎和其它传染性疾病。
不足杀菌效果受使用条件影响较大,对眼及皮肤有致敏性,有异味等。它可以作为冲击性处理剂使用,同样含有稳定剂氰尿酸,在紫外线下稳定,适合在室外泳池使用,但在室内泳池内使用会导致过稳定问题。
三氯异氰尿酸三氯异氰尿酸俗称为强氯精,分子式C3N3O3Cl3 简称TCCA,是异氰尿酸的氯化衍生物,其有效氯含量高达90%,主要为粒状、片状,杀菌能力很强。
优点:三氯异氰尿酸是目前国际上所推广的一种高效、低毒、广谱、快速的杀菌消毒剂,能有效的快速杀灭各种细菌、真菌、芽胞、霉菌、霍乱孤菌。对杀灭甲肝、乙肝病毒具有特效,对性病毒和艾滋病毒也具有良好的消毒效果。
不足:其溶解缓慢,在泳池负荷高的时候可能会跟不上余氯消耗的速度,导致消毒能力降低。其pH较低,也需要大量的碱调节。三氯异氰尿酸含有稳定剂氰尿酸,在紫外线下稳定,适合在室外泳池使用,但在室内泳池中使用会导致过稳定问题。同时,使用三氯异氰尿酸亦会不可避免地产生有害的氯代副产物,这也是氯系化学剂的共同缺点。
(6)溴氯海因优点:溴氯海因俗称之为溴片(英文简称BCDMH) ,分子式: C5H6BrClN2O2。它的有效成分含有氯和溴,一般为结晶状粉末和白色片剂,溴制剂比氯制剂更稳定,气味更温和,对pH的变化不如氯那么敏感。不足:溴片价格较高,由于其微溶于水因而杀菌速度也较慢。溴制剂在高剂量下具有腐蚀性,对人的皮肤、眼及细胞有强烈的刺激性,在泳池的条件下,会产生溴酸根,那是一种已知的致癌物。由于溴没有合适的紫外线稳定剂,因此在户外游泳池使用时,其用量很大。
(7)二氧化氯分子式为ClO2,是一种有刺激气味的黄绿色气体,易挥发。在-5~95°C下,质量稳定,不易分解。加入酸以后可被激活,产生游离二氧化氯。它不属于含氯消毒剂,实际上为过氧化物类消毒剂。
优点:二氧化氯具有很强的氧化作用,能使微生物蛋白质中的氨基酸氧化分解,导致氨基酸断裂、蛋白质分解,从而使微生物死亡。它是一种高效消毒剂,可以杀灭各种微生物,包括细菌繁殖体、芽胞、真菌、病毒,甚至原虫等。消毒快而持久,消毒副产物少,有效的杀灭和水质控制效果,应用PH范围大,适用水质范围广,氧化有机物能力强。
不足:二氧化氯本身及其消毒产物也有毒性,副产物会产生亚氯酸与氯酸,其综合作用引起突变、精子畸形、血液和尿液化学成分异常,影响肝功能与肾功能衰竭。有机物对该消毒剂有一定的影响,杀菌效果多受活化剂浓度和活化时间的影响。二氧化氯需要有现场发生设备,设备的投资较大,运行费用较高。现场反应需要使用危险化学品作为原料,这些都形成危险隐患。
氯系化学药剂消毒的缺点(1) 氯系化学药剂都具有一定的毒性,水中的氯代有机化合物会刺激人的眼睛及皮肤,从而引发红眼及皮疹。 长期与池水接触会使人的头发变色发黄,皮肤红肿,阴道瘙痒,内分泌失调等部题。 (2) 氯制剂会与水中的有机物反应生成多种氯代有机化合物,如三氯甲烷、氯仿等,这些物质均为公认的致癌致突变物。特别是小孩处于发育阶段,应尽量避免接触。 (3) 对泳池结构、设备和管道有腐蚀作用;操作管理水平要求高,否则会发生安全事故; (4) 加入氯制剂后,必然会导致水的pH值的改变,使人感到不适,因而需加入碱性或酸性物质予以中和。 (5) 氯制剂在运输、储藏、使用时具有一定的危险性。
二、紫外线消毒法紫外线是一种低能量的电磁辐射,其能量只有5eV,穿透力很差。紫外线照射能量较低,不足以引起原子的电离,仅产生激发作用,使电子处于高能状态而不脱开。通过对水体进行紫外线辐射透入微生物体内作用于核酸、原浆蛋白酶,使其发生化学变化而造成微生物死亡。一般多以253.7nm作为杀菌紫外线波长的代表,由于紫外线灯使用较方便,并有一定杀菌作用,所以在卫生防疫、医疗和工业消毒中使用均较普遍。
优点:紫外线消毒的优点是所需接触时间短,杀菌效率高,同时不改变水的物理化学性质,且不产生气味和其他有害的卤代甲烷等副产物。
不足:对消毒前的原水浊度要求较高,且必须保证一定的水流厚度,当水深较大时杀菌效果急剧下降,且消毒后水中无持续杀菌作用,紫外线消毒也要使用其特定的装置,每支灯管处理水量有限,且需定期清洗更换,成本也较贵,并存在光复活现象,影响消毒效果。
三、臭氧消毒法臭氧在常温常压下是一种不稳定的淡紫色气体,对各种病毒、细菌均有杀灭能力,对降解各种有机毒物,除色、除嗅、除味、改善水质效果极佳。其作用机理是通过破坏细菌的脱氢酶干扰其呼吸功能,氧化各种酶和蛋白质,破坏细胞膜结构而达到消毒的效果。
优点:氧化能力强,能去除或降低水中异味、臭、色和金属离子问题,兼有助凝去降浊度的作用。杀菌效果显着,作用迅速,消毒效果受水质影响小,广谱高效,副作用较小。 (1)反应快、投量少,臭氧能迅速杀灭扩散在水中的细菌、芽孢、病毒且在很低的浓度时既有杀菌灭活作用; (2)臭氧适应能力强,在PH5.6-9.8,水温0-37℃的范围内,对其的消毒性能影响很小; (3)在水中不产生持久性残余; (4)能破坏水中有机物,改善水的物理性质和器官感觉,进行脱色和去嗅去味作用,使水呈蔚蓝色,而又不改变水的自然性质。
不足:(1)臭氧对藻类和红线虫等处理效果差。对受到有机物污染的进水中进行臭氧处理后,大的有机物分子会破裂成微生物新陈代谢的营养源,处理后使水中AOC(生物可同化有机碳)增加2-6倍,并使水中氧含量增加,利于自养型微生物繁殖,进而使水质恶化呈绿色。 (2)无持续作用,要投加药剂协助。因臭氧在水中的溶解度低,半衰期很短,仅二十分钟,所以在日常应用中为保证持续的杀菌作用,往往要投加氯系药剂协助进行。 (3)臭氧消毒法设备费用高,耗电大,使用臭氧机往往还要配备制氧机、干燥机、尾气处理器等。这些乃限制臭氧消毒广泛推广使用的主要原因。 (4)臭氧有毒性。作为强氧化剂,它是一种很好的消毒剂,恰恰因为这种特性,臭氧几乎能与任何生物组织反应,所以我们在使用臭氧发生器的时候一定要注意其量。但目前的技术对臭氧监测较困难,当臭氧超标时,会与呼吸道中的细胞、流体和组织很快反应,导致肺功能减弱和组织损伤。长期处于臭氧环境,会造成人的神经中毒,头晕头痛、记忆力衰退;氧化人体皮肤中的维生素E,致使人的皮肤起皱、 出现黑斑等。
四、铜银金属离子消毒法金属离子处理法应用于泳池领域在欧美和日本已相当成熟,是新一代泳池处理技术的领航者。由于金属离子处理法采用纯物理法消毒,处理后不产生任何有害副产物,水质达到欧盟标准,因整个过程不产生废气废物而得到了欧盟环保署的认可与推荐。目前在国际空间站、奥运会泳池、高档别墅私家泳池等得到广泛应用。 作用机理: ①据研究,水中的细菌或微小有机物普遍带负电,由安康系统激发的银与铜离子带正电,因此在水中铜银离子能与细菌病毒或微小有机体引致凝絮过程,通过过滤系统把凝絮物清出池外。 ②银离子还原势极高,是自然界中杀菌能力最强的金属离子,每升水中只要含亿万分之二毫克的银离子,即可杀死水中大部分细菌。当细菌被Ag杀后,Ag又由细菌死亡细胞中游离出来,再与其它菌落接触,周而复始地进行上述过程,这也是银杀菌持久性的原因。 ③铜离子对细菌特别是自养型细菌有很强的抑制作用和杀灭作用,可以杀灭在水中的大肠杆菌、痢疾等病菌,特别是防止绿藻污染和通过地板传染足癣等等。目前通常使用的各种消菌除藻剂都含有铜成份,就是运用了铜离子能够杀菌灭藻的原理。
优点:⑴应用PH、温度范围大,适用水质范围广,运行成本低; ⑵无味、无毒,过量投加不会造成危害(是人体必需微量元素,人体吸收过量会自动排出体外)。不会刺激眼睛、皮肤,水体清澈无异味。 ⑶可长期抑制某些藻类和真菌的生长,不需额外投加除藻剂硫酸铜。 ⑷不影响水质PH值,无需添加酸碱度中和剂,因整个反应过程无添加任何化学药剂,因而不会生成有害副产物造成二次污染。 ⑸接触充分时,很低浓度便可杀绝大多数自养细菌,有很持久的杀菌能力,不受光照和有机物浓度影响; ⑹水中细菌微生物、浊度、有机色度和其他胶态悬浮物质都会被铜银离子吸附,兼有杀菌和去浊度功能。
不足:⑴因整套铜银离子消毒设备费用昂贵,目前只在国际空间站,国内外奥运会场馆、高档别墅私家泳池、休闲会所及酒店等应用广泛。
游泳池在使用游泳池消毒剂来进行消毒时,最好分两次投放,一次在每天的收场后,另一次在开放前1—2小时进行。 这种以三氯异氰尿酸为主要成分的游泳池消毒剂属于含氯消毒剂,有挥发性的。挥发的快慢与阳光、气温有直接的关系,夏天阳光猛烈,天气炎热消毒剂很容易挥发。在每天的收场后投加消毒剂的话,由于晚上气温相对较低,也没有阳光,可以使消毒剂保持更长的药效,这样可以更加彻底、有效地对游泳池的水体进行消毒;第二天根据各个游泳池场的开放时间不同,可在开放前1—2小时检测余氯,如果余氯偏低的话,可适量补充投加消毒剂,以使余氯达到卫生要求。如过早投加消毒剂的话,很快就挥发完了,那到了开场时间余氯就达不到标准了。三氯异氰尿酸和以三氯异氰尿酸为原料的系列消毒杀菌剂,白色粉末,颗粒,片状、块状,饼状,球状、液体包装等规格,是目前国内外用途最佳、适应范围最广、加工出口量最大,最理想的消毒杀菌剂,无论在消毒杀菌效果还是在经济价格上,三氯异氰尿酸都可以完全取代以往的各种消毒杀菌剂,达到高效、安全、广谱和使用方便等效果,三氯异氰尿酸在国内外已广泛应用于工业循环水处理、饮用水处理、废水污水处理、游泳池处理、工业漂白,公共场所、医院、家庭,种子、养殖消毒杀菌和羊毛防缩等诸多方面,几乎对所有的真菌、细菌、病毒、芽孢都有杀灭作用。固体制剂,贮运和使用方便、安全;除液氯外,氯含量最高的含氯消毒剂,性价比高;目前世界上游泳池水处理消毒用途使用最广泛的药剂;缓释和速溶两种片剂剂型适合不同类型的加药设备和用途;含氯稳定剂配方,有效抑制紫外线对氯的消耗损失,保持池水的氯含量缓释型: 20~200克/片,氯含量85~90%;一次性投放可以维持药效5~7天;投放剂量均匀持续,有效防止池水中氯含量的波动;使用于固体氯片加药器、氯片浮盅、池面撇沫器、一体化过滤设备等系统 我们供游泳池水质维护其他药剂,专业解决游泳池、按摩池、水疗池、温泉水质问题: 1,池水变绿急救处理; 2,尿素超标处理; 3,消除泳池环境氯臭味道; 4,杀灭绿藻、水虫; 5,改善水质颜色与混浊; 6,解决地下水金属离子问题; 7,使水质恢复到原有的健康度,增加池水湛蓝亮丽的颜色; 产品的理化性质 名称:三氯异氰尿酸(英文缩写TCCA) 俗称:强氯精,消毒杀菌剂规格:本品质量符合ZBG16009—89标准要求:有效氯含量≥90% 分子式:C3O3N3Cl3 物化性质:本品为白色结晶粉末或粒状物,具有次氯酸的刺激气味,比重0.96,在水中溶解度为:1.2克/100克(25°C),遇酸或碱分解

② 日本为什么不用光触媒除甲醛

日本装修方面根本没除甲醛需求,日本对板材的要求极高,材料根本不含甲醛,光触媒是日本人用在涂外墙的,岛国潮湿,光触媒可以杀死霉菌,防止墙体发霉。

光触媒去除甲醛的技术其实就是一种通过二氧化钛的纳米材料帮助去除室内空气的有害物质,因为这种材料本身带有一定光催化的效果,在光的照耀之下产生光合作用比较相似的催化反应,从而可以产生氧化性非常强悍的物质。

比如说活性氧,然后再通过氧化还原反应,将甲醛这种有害的物质进行氧化分离,转换成为二氧化碳和水,从而减少室内装修带来的污染。光触媒去除甲醛的技术,目前在世界卫生组织所是被认可的,不仅持续的时间非常久,而且也不用担心,因为装修污染的二次产生。

在目前除了光触媒去除甲醛技术非常有效之外,比如化学试剂和活性炭去除甲醛也是非常不错的,在使用化学试剂祛除甲醛的时候,可以使用不同的化学试剂,很少在需要去除甲醛的区域,比如说墙面或者是新买的家具上,可以通过化学反应将甲醛有效的清理专家。

(2)日本微小循环系复活剂怎么样扩展阅读

产品优势

1、全面性:光触媒可以有效地分解甲醛、苯、甲苯、二甲苯、氨、TVOC等污染物,并具有高效广谱的消毒性能,能将细菌或真菌释放出的毒素分解及无害化处理。

2、持续性:在反应过程中,光触媒本身不会发生变化和损耗,在光的照射下可以持续不断的净化污染物,具有时间持久、持续作用的优点。

3、安全性:无毒、无害,对人体安全可靠;最终的反应产物为二氧化碳、水和其他无害物质,不会产生二次污染。

4、高效性:光触媒利用取之不尽的太阳能等光能就能将扩散了的环境污染物在低浓度状态下清除净化。

③ 求一部好看的日本动画片~

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[结界师]魔法+妖怪+爱情+战斗(有点带魔法但是不是完全魔法大部分是妖怪)已完结
远古时期,天地间妖神鬼怪横行,好似一幅百鬼画卷。但是在这奇异的景象中,人类并不显得平凡。世界上有一些人天生拥有超乎长人的能力。看穿千里之外,突然长出翅膀,甚至是凭空创造异空间……这些人被知情者称为——异能者。异能者之中又有一些更加强盛的家族,将特异能力发挥至极致,他们则被称为——术者。但无论用多么绚丽的词藻修饰,这些人都注定是不被普通人类所接受的。拥有这些能力的豪门家族,往往将特异能力看为家业的一部分,所以家族继承人的委任就与继承人异能素质的强弱产生必然联系。然而那些没有资格继承家督之位的人,既被家族轻视,又失去了在普通人类社会的立足点。这些人要何去何从呢?收容编制所有不能继承家业的异能者;调查管理一切奇异事件;游离于人类世界之外,但是却居高临下,以保护者的姿态审视着人类……这就是统治异能者的巨大组织——里会。他们不能堂堂正正步行于人间,只能悄悄藏身在里侧世界;却又知晓不被常世间理解的秘密。

[小女神花铃]爱情+一点校园+魔法+神秘+一点战斗(虽然是爱情故事但是还是值得去看看,那些惊人的场面)第一季已完结,未出第二季
从小没有双亲的花铃,一直一个人坚强的生活着,但是,就连她最喜欢的也是她唯一的精神寄托的小猫小西也死了,彻底只有一个人的花铃在这时候遇到了一个叫做九条和音的少年和一个叫做姬香的少女。和音虽然是个美少年但是却十分蛮横无理。对此有点在意的花铃,时而温柔,时而冷淡。一个人总是感到脸红心跳,难道这就是恋爱的预感?少女的新慢慢的产生了动摇。但是,就在花铃这么想的时候,他们的相遇已经使得花铃的命运产生了巨大的变动。这是偶然……还是必然?掌管着“神”力量的戒指的秘密,现在,幻想世界的门扉即将打开。

[黑之契约者]爱情+战斗+一点神秘(在日本各大地区可是受人好评的哦^^)未完结
舞台定于喧嚣繁华的都市——东京。某日东京突然出现了异现象——不能解析的领域“地狱门”。在那里,有着人们从未遇见过并持有着超能力的来访者。人们称这些来放者为“契约者”,他们有的失去心智,有时甚至会残酷地杀害人类,“契约者”来到东京到底意欲何为……?

[水果篮子]好笑+友情+一点感人(我有很多朋友都很喜欢看这个,自己看过一点觉得还错啦~) 已完结
积极开朗又有些“脱线”的高中女生本田透由于相依为命的妈妈意外车祸离世,被好心的爷爷收养。但是由于姑姑也要到爷爷家住,爷爷家的房子要改建,小透只好以到朋友家住的名义暂时在森林裏搭起了帐篷住了下来,就是在这片草摩家的森林裏,小透重新结识了班裏的英俊“王子”草摩由希,也接触到了草摩家的秘密。由于被诅咒的命运,草摩家的人过着痛苦的生活,每个人都有伤心的往事,积极又乐观的小透的出现给草摩家带来了笑容和希望。

[驱魔少年]战斗+一点友情(虽然大部分人都认为D-grayman有点暴力但是还是一部不错的作品)未完结
背景为虚构的19世纪,梵蒂冈为阻止约7000年前发生的“挪亚大洪水”又称“黑暗三日”再度降临,创建“黑色教团”,结集散布各地的圣洁(INNOCENCE),而及寻找其使用的适合者-驱魔人对抗恶魔制造者千年伯爵。恶魔是以“机械”、“灵魂”以及“悲剧”为材料所制造出来的恶性武器。千年伯爵制造出这些悲哀的恶魔准备将世界带向终点,而被神选中的圣职者以“对恶魔武器”救赎灵魂,主角-艾伦·获加与众驱魔人将挺身而战。

[武器种族传说]爱情+友情+冒险+斗打(刚刚看完,觉得还不错,尤其是后半部分都很感人)已完结
在这个只有极少一部分人开始得到飘浮在天空的神秘力量的世界·“庭园”在那里,“圣战天使”——一种能够与人类合体,变身为最强武器并与人类共同战斗的梦幻种族,在人类面前开始复活了。少年酷是空盗团的冒失鬼,有一天他与被封印的美少女蕾邂逅了。不轻易向他人敞开心扉的蕾,其实是梦幻种族“圣战天使”。蕾告诉酷,她想去传说之地“艾迪鲁庭园”。因此,酷和蕾变踏上了旅途。另一方面,保护圣战天使的完全协会的成员希丝卡、罗文,奇雅以及协会所属的艾迪莱特族的三人也要护送蕾。于是,酷、蕾再加上来自完全保护会的三个人,向有着“存在于天之尽头、云之彼岸的空中的黄金大地”之称的“艾迪鲁庭园”出发!

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⑤ 微生物与自然界中物质循环的转换关系

周德庆微生物学笔记下

3节:环境条件对生长影响
一、温度
影响两方面。
最低、最适、最高生长温度,致死温度。
微生物生长温度类型:
低温型(嗜冷微生物)
中温型(嗜温微生物)
高温型(嗜热微生物)
二、pH
主要影响:引起膜电荷变化,从而影响营养吸收;影响酶活性;改变营养物状态和有害物毒性。
有最适pH,此时酶活性最高,其他条件适合,生长速率最高,但不是生产的最适pH。
微生物细胞内的pH多接近于中性。
pH调节措施:
三、氧化还原电位 Eh
Eh与氧分压有关,也与pH有关。
不同种类微生物所要求的Eh不同。
Eh影响酶活性,也影响呼吸作用。
四、辐射
指通过空气或外层空间以波动方式从一个地方传播或传递到另一个地方的能量。
(一)紫外线(非电离辐射)10-380nm
致死主要是细胞中很多物质对紫外线吸收。杀菌作用随剂量增加而增加。紫外线穿透力弱,应用于空气消毒、表面消毒、菌种诱变。
(二)电离辐射(X、α、β、γ)
效应无专一性, α、β穿透力较弱,X、 γ较强。
KI对电离辐射具保护作用。
五、干燥
水分对正常生长必不可少,各种微生物抵抗干燥能力不同。
六、渗透压
微生物对渗透压有一定适应能力。高渗溶液—质壁分离,低渗溶液—细胞膨胀破裂。
七、超声波(20,000Hz以上)
使细胞破裂,科研中破碎细胞。
八、表面张力
4.5--6.5x10-4 N/cm,降低影响。
4节:灭菌与消毒
灭菌 sterilization :杀死所有微生物。
消毒 disinfection :杀死一切病原微生物。
防腐 antisepsis:利用理化因素抑制微生物生长繁殖。
化疗 chemotherapy:利用具有选择毒性化学药物或抗生素来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖,借以达到治疗的一种措施。

一、常用灭菌消毒方法
1、干热灭菌法
火焰灭菌(灼烧灭菌)、干热灭菌
2、湿热灭菌
巴氏消毒、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、间歇加热灭菌、实罐灭菌
3、过滤除菌
4、放射线灭菌
二、常用的消毒剂
理想的消毒剂:杀菌力强,使用方便;价廉;对人、畜无害;能长期保存;溶解度大;无腐蚀性等。
消毒剂种类:氧化剂、重金属盐、有机化合物
相对药效:
三、影响灭菌与消毒因素
1、微生物种类
2、培养基
3、消毒剂
4、环境因素
5节:化学疗剂对微生物作用
能直接干扰病原微生物的生长繁殖并可用于治疗感染性疾病的化学药物。
化学疗剂能选择性地作用于病原微生物新陈代谢的某个环节,使其生长受到抑制或致死。
一、抗代谢物
结构上类似,竞争性地与酶结合,只有当正常代谢物量少或不存在时才起作用。
最常用的是磺胺类药物。是氨苯磺胺衍生物,其结构与对氨基苯甲酸(PABA)类似,而PABA是叶酸分子组成。叶酸是辅酶,在氨基酸、维生素合成中起重要作用,许多细菌需自己合成叶酸,而人和动物利用现成叶酸,因此不受磺胺干扰。
还有异烟肼rimifon,是吡哆醇对抗物。
二、抗生素
作用范围:抗菌谱
作用位点:
1、抑制细胞壁合成:青霉素,多氧霉素
2、影响细胞膜功能:多肽类,多烯类
3、干扰蛋白合成:抑制而非杀死
4、阻碍核酸合成:对细胞有毒
三、微生物抗药性
对药物的适应性即是抗药性。
抗药性主要表现(产生机制)
1、菌体内产生钝化或分解药物的酶
2、改变膜的透性而导致抗药性产生
3、被药物作用的部位发生改变
4、形成救护途径。
五章:微生物遗传
遗传heredity—亲代将其特有的生物学特性传递给子代。
遗传性—子代总保持与亲代相同的生物学特性。
遗传型genotype—生物体所具有的全套遗传物质总称。又称基因型。
表型phenotype—特定环境中生物体表现出的种种形态与生理特征。
变异variation— 遗传型的改变。
适应或饰变modification—表型的改变。
基因—指带有足以决定一个蛋白质全部组成所需信息的最短DNA片段。
菌株&克隆—指一组遗传型相同的细胞群。
微生物在遗传上特点:
1、微生物细胞结构简单,营养体一般为单倍体,方便建立纯系。
2、很多常见微生物都易于人工培养,快速、大量生长繁殖。
3、对环境因素的作用敏感,易于获得各类突变株,操作性强。大多是无性生殖,变异易保留。
1节:遗传变异的物质基础
一、证明经典实验
(一)转化实验
1928,Griffith首次发现Streptococcus pneumoniae的转化现象。
1944,Avery等在离体条件下重复这一实验,并对转化本质进行了研究。
终于证明了DNA是遗传物质。
Griffith转化实验:
Avery转化实验
(二)噬菌体T2的感染实验
1952,Hershey & Chase 用E. coli, phage T2做材料,利用同位素示踪法进行实验。
蛋白质只含S不含P,DNA只含P不含S,分别用35S、32P标记E. coli, 用T2感染,得到35ST2、32PT2。
实验过程(插入)
(三)病毒拆开与重建实验
1956,Fraenkel & Conrat 用TMV(烟草花叶病毒)和HRV(霍氏车前病毒)进行实验,说明遗传信息在RNA中。
(插入)
二、遗传物质在细胞中存在方式
(一)细胞水平
(二)核水平(plasmid)
(三)染色体水平
(四)核酸水平
(五)基因水平(遗传功能单位)
(六)密码子水平(遗传信息单位)
(七)核苷酸水平(最低突变或交换单位)
染色体外遗传物质—质粒
染色体外,独立存在的,能自主复制的遗传物质。
双股环状DNA,可游离存在,也可整合到宿主DNA上。
吖啶类染料、高温、某些离子作用可消除质粒。
附加体episome:质粒插入到染色体上和染色体一起复制。
质粒种类
1、F因子(致育因子):大肠杆菌中发现,含质粒为F+(♂);无质粒为F-(♀);质粒DNA整合到染色体上为Hfr.
2、R因子(耐药性):痢疾杆菌,多价耐药性,耐药信息携带在质粒上。
3、Col因子(大肠杆菌素产生因子)
4、青霉素酶质粒
5、Ti质粒(诱癌质粒):植物根癌,植物基因工程重要载体。
6、降解质粒:Pseudomonas
隐蔽质粒、表达质粒、分泌质粒等。 ←
2节:基因突变
突变mutation—遗传物质核酸中的核苷酸顺序突然发生了可遗传的变化。
包括基因突变(点突变)—由于DNA链上的一对或少数几对碱基发生改变而引起。
染色体畸变—DNA的大段变化现象,表现为插入、缺失、重复、易位、倒位。
由于重组或附加体等外源遗传物质的整合而引起的DNA改变,不属突变范围。
一、基因突变
(一)类型
按突变体mutant表型 特征不同
1、形态突变型:细胞或菌落形态改变。
2、生化突变型:代谢途径变异
营养缺陷型—由基因突变引起某酶合成能力丧失,必须在原有培养基中添加相应的营养成分才能生长。
抗性突变型—能抵抗有害理化因素,包括抗药性、抗噬菌体等。
抗原突变型—细胞成分尤其是表面成分的细致变异。
3、致死突变型:基因突变导致个体死亡。
4、条件致死突变型:在某一条件下呈现致死效应,如温度敏感突变型。
如果从研究者能否从巨大群体中迅速检测和分离出个别突变体的目的来看,则只有两类突变:
选择性突变—具有选择性标记,可通过某种环境条件使它们得到优势生长,从而取代原始菌株。
非选择性突变—无选择性标记,而只有一些性状的数量差别,如菌落大小、颜色深浅、代谢物产量等。
(二)特点
1、不对应性:
突变的性状与引起突变的原因间无直接的对应关系。
相应的环境仅起着淘汰原有非突变型个体的作用,如果说其有诱变作用,也可以诱发任何性状的变异,而不是专一性地诱发一种变异。
2、自发性:
各种突变可以在没有人为的诱变因素下自发发生。
3、稀有性:
自发突变频率较低,一般10-610-9 。
突变率— 每个细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率。或每单位群体在繁殖一代过程中形成的突变体的数目。
一个细胞长大分裂成两个细胞的过程称为细胞世代。
细胞世代数=n-n0, 对于异步生长来说,对数生长期,平均世代数= n-n0 /Ln2, m 为n-n0 期突变体数目,
突变率= m
n-n0 /Ln2
测定m的简单办法是将一细胞群体培养在平板上,让突变在平板培养中发生。这种情况下,每一突变产生一固定在原位的突变体克隆,经适当处理可以以单一菌落状态检出。
非选择性突变的突变率很难测定。
4、独立性:
突变的发生一般是独立的,某一基因的突变,既不提高也不降低其他基因的突变率。突变不仅对某一细胞是随机的,而且对某一基因也是随机的。
5、诱变性:
诱变剂作用可提高突变率。
6、稳定性:
遗传物质结构发生的稳定变化,因而产生的新性状也是稳定的,可遗传的。
7、可逆性
野生型突变型,为正向突变
野生型突变型,为回复突变(回变)。
(三)自发性与不对应性的证明
突变是通过适应而产生的,突变的原因与性状间是相对应的。
突变是自发的,与环境是不相对应的。
1、变量试验(1943,Luria & Delbruck)
实验要点:(插入)
结果:甲各皿抗性菌落数相差较大,乙各皿数基本相同。
说明:抗性突变不是由噬菌体诱导出来的。
如果是噬菌体诱导的话,结果会怎样?
突变发生在什么时间?
噬菌体起什么作用?
2、涂布试验(1949,Newcombe设计)
实验要点(插入)
说明:抗性突变发生在未接触噬菌体之前,噬菌体加入只起筛选作用。
如果不是这样,结果会怎样?
3、影印培养试验(1952,Lederberg设计)
影印培养法—使在一系列培养皿相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法。
利用此法可以从在非选择性条件下生长的群体中,分离出各类突变体。
实验要点:(插入)
结果:3上出现抗性菌落,在2上找出相应菌落接种到含药平板上,长出抗性菌落。而取与3上无对应关系的菌落接种到含药平板上则无生长。

(四)突变机制
1、诱变机制 ince mutation , mutagen
1)碱基对置换(点突变)
只涉及一对碱基被另一对碱基所置换,分为转换和颠换。
①直接引起置换的诱变剂
可直接与碱基发生反应,不论在体内还是离体都起作用。包括亚硝酸、羟胺和各种烷化剂(硫酸二乙酯、NTG等)。
以HNO2为例:
HNO2 可使碱基氧化脱氨,使A→H,C→U,G→X。
AT→HeT HkC HkC
②间接引起置换的诱变剂
一些碱基结构类似物,但稳定性比正常碱基小,易发生互变。通过活细胞的代谢活动掺入到DNA中,只对正在生长发育的细胞有作用,即DNA复制时起作用。
主要是5-BU,5-AU,2-AP,8-NG等。
以5-BU为例:
AT A:5-BU(酮式) AT GC
AT G:5-BU(烯醇式) A:5-BU(酮式)
还可以看出5-BU掺入引起GC回复至AT的过程。

碱基对置换对密码子影响
简拼 UCG(Ser)(不表现突变现象)
错义 UAC(Tyr)
UCC 错义 UUC(Phe) (所合成蛋白质
(Ser) 有活性或纯化)
无义 UAA(终止符)(合成一些蛋白质碎片)
2)移码突变
由一种诱变剂引起DNA分子中一个或少数几个核苷酸的增添或缺失,从而使该部位后面的全部密码的转录和转译发生错误。也属于DNA分子的微小损伤。
主要是吖啶类染料,一系列ICR化合物。
在DNA链上增缺1、2、4、5碱基,可引起移码突变,增缺3、6,则不影响读码,只引起短的缺、增。
3)染色体畸变
DNA分子大的损伤。
①数量变化:真核有倍数性变化和非倍数性变化;原核只一条染色体,获得一段DNA,形成部分二倍体。
②结构变化:又分染色体内与染色体间畸变(非同源染色体间易位)。
4)转座因子 transposible element
1940`s B. McClintock 玉米遗传研究发现染色体易位。
在染色体组中或染色体组间能改变自身位置的一段DNA序列称作转座因子。
有三类:
插入序列 IS:0.7-1.4 kb,只能引起转座效应,不含其它基因。
转座子 Tn :2-2.5 kb,含有几个至十几个基因。
Mu噬菌体:37 kb,含有20多个基因。

2、自发突变机制
Spontanous mutation:指微生物在没有人工参与下发生的突变。
1)背景辐射和环境因素的诱变:低剂量长期效应。辐射、高温、低浓度诱变剂。
2)自身代谢产物的诱变:H2O2—内源诱变剂。
3)互变异构效应:T、G酮式或烯醇式,A、C氨基式或亚氨基式。一般倾向于酮式和烯醇式。T以烯醇式与G配对,C以亚氨基式与A配对。
4)环出效应:DNA复制过程中偶尔环出。
(五)紫外线对DNA的损伤及机体对损伤DNA的修复
紫外线作用:同链DNA的相邻T间形成共价T二聚体,阻碍碱基间正常配对,从而引起突变或死亡。
机体对损伤DNA的修复:
1、光复活作用:经UV照射后的微生物暴露于可见光下,可明显降低起死亡率,此称光复活作用。
2、暗修复作用(切补修复):与光无关,须4种酶参与:核酸内切酶、核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶。
3、重组修复:发生在DNA复制过程或复制之后,不切除DNA损伤部位的修复。DNA链在复制时,受损的模板作用消失,互补单链(新链)里留下空隙,产生诱导信号,recA基因被诱导,产生大量重组蛋白,与新链缺口结合,引起 子链和母链交换。交换后母链缺口,通过聚合作用,以对侧子链为模板合成DNA 片段填充,连接酶连接新旧链完成复制。
4、SOS修复 :一种能够引起误差修复的紧急呼救修复,是在无模板DNA 情况下合成酶的诱导修复。正常情况下无活性有关酶系,DNA受损伤而复制又受到抑制情况下发出信号,激活有关酶系,对DNA损伤进行修复,其中DNA多聚酶起重要作用,在无模板情况下,进行DNA修复再合成,并将DNA片段插入受损DNA空隙处。
5、DNA 多聚酶的校正作用:DNA 多聚酶除了对多核苷酸的多聚作用外,还具有3`到5`核酸外切酶作用,依***这一作用,能在复制过程中随时切除不正常的核柑酸。
上述修复中前3种属无错误修复,使诱变作用降低。而SOS修复属易误修复,造成误差修复,引起突变。
3节:突变与育种
菌种工作包括三方面:选种、育种、复壮和保藏。
选种—从自然界和生产中选择符合需要菌种。
育种—进一步提高已有菌种某种性能,使更符合要求。
选育新菌种可从几方面着手:
1)从原有菌株入手进行各种遗传改造工作。
2)根据文献资料报导的微生物种属,向国内外菌种保藏机构索取同种或同属菌株,从中寻求符合要求者。
3)根据所需菌种特性、嗜好或工艺要求,从特定的生态环境中以特定方法重新分离自然菌株。
(一)从自然界分离菌种(菌种分离与筛选)
一般步骤:(插入)
一、采样
主要以土壤为样品,一般采5-20cm深处土,须记录日期、地点、环境情况等。要根据筛选目的、微生物分布、菌种特性以及与之有关的环境,综合考虑,具体分析来决定。
二、增殖培养(富集培养)
实际上是初筛浓缩,方法主要是:
1、控制营养成分;2、控制培养条件。
菌种筛选主要步骤
调查研究及查阅充分的资料

设计实验方案
↓确定采集样品的生态环境
采样
↓确定特定的增殖条件
增殖培养
↓确定特殊的选择培养基及可能的
↓定性或半定量快速检出法
平板分离

原种斜面
↓确定发酵培养基础条件
筛选

初筛(1株1瓶)

复筛(1株3~5瓶)
↓结合初步工艺条件摸索
再复筛(1株3~5瓶)

3~5株

单株纯种分离
↓ 生产性能试验
↓→毒性试验
菌种鉴定
三、分离
目的微生物不纯,需分离纯化。采用简便迅速,有一定准确性的检出方法,提高筛选效率。常用平皿反应法:
纸片培养显色法:浸有指示剂滤纸。
透明圈法:混浊底物被分解后形成透明圈。如可溶性淀粉、碳酸钙等。
变色圈法:直接用显色剂或指示剂。
生长圈法:利用某些具有特殊营养要求的微生物作为工具菌,要分离的微生物能在一般培养条件下生长而合成该营养物而使工具菌能生长,形成生长圈。
抑制圈法:琼脂块培养法。
四、筛选
即进行生产性能测定,确定适合生产要求菌种。
一般初筛、复筛、再复筛,少数几株进行全面考察。
筛选时培养条件确定是关键,培养基组成、通风、pH、温度等应根据菌株性能、产物代谢途径、类似产品的培养条件及前人的工作进行综合考察,慎重选定。
初筛一株一瓶,取其中10-20%复筛,一株3瓶,直至最后3-5株,广泛考察。
(二)自发突变与育种
一、生产育种
二、定向育种
用某一特定环境长期处理某一微生物群体,同时不断地进行移种传代,以达到积累和选择合适的自发突变体的一种古老育种方法。
近年发展代谢类似物的梯度培养皿法。
(三)诱变育种
利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群,促进其突变率大幅度提高,然后设法采用简便、快速、高效的筛选方法,从中挑选少数符合目的的突变株,以供生产科研之用。
基本工作步骤:
基本步骤
原种 (出发菌株) → 纯化→斜面→同步培养→离心洗涤→振荡打散→过滤→菌悬液
→诱变处理 → 平板分离 → 斜面 → 斜面→ 斜面 →保藏及扩大试验
(活菌计数) (计数) (变异率)(初筛) (复筛) (再复筛)
一、出发菌株的选择
用作出发菌株有:野生型菌株;生产菌株;经过诱变的菌株。
一般要求生长快,营养要求粗放,发育早,产孢子多,对诱变剂敏感性高,已能积累少量产品或前体物的菌株。
二、菌悬液制备
一般采用单孢子或单细胞悬液。
诱变剂一般只作用与DNA的一条链,发生变异无法反映在当代表型上,只有经过DNA复制和细胞分裂后,才会使表型发生变异,此即表型延迟。
制备菌悬液时要注意生理状态、均一性、细胞浓度、菌悬液介质(生理盐水或缓冲液)。
三、诱变处理
1、常用诱变剂:
物理诱变剂:紫外线(UV)、X射线、r射线、快中子(0.2-10Mev)。
化学诱变剂:硫酸二乙酯DES,甲基磺酸乙酯EMS,亚硝基胍NTG。
总结表
2、诱变剂量:
诱变剂作用:提高突变率;扩大产量变异幅度;使变异朝正变或负变方向移动。
凡是在高诱变率基础上,既能扩大变异幅度,又能使变异移向正变范围的剂量就是合适剂量。图8-21
3、处理方法:
采用复合处理,包括诱变剂先后使用,同时使用和重复使用,提高效果。
表8-8
四、变异菌株的分离和筛选
诱变处理后一般要经过后培养和变异株筛选。
一般将筛选分为初筛和复筛。
初筛重点在于分离培养尽可能多菌株,采用预先设计的相同培养条件,以量为主,准确性其次,减少漏筛机会。
复筛以质为主,反复多次。
高效筛选方案:
寻找利用和创造形态、生理与生产性状间的相关性。
筛选抗生素生产菌时,可采用琼脂块培养法:图8-22
(四)营养缺陷型筛选
基本培养基(MM,[—]):凡能满足某一菌种野生型和原养型菌株营养要求的最低成分的组合培养基。
完全培养基(CM,[+]):在基本培养基中加入一些富含生长因子的物质,以满足该微生物各种营养缺陷型要求。
补充培养基(SM,[X]):在基本培养基中有针对性地加上某一种或几种其自身不能合成的成分,以满足相应营养缺陷型生长的培养基。
营养缺陷型表示:所要求的营养物的头三个字母表示,如bio-,对应的野生型以bio+表示。
一般步骤:
1、诱变处理
2、淘汰野生型:抗生素法、菌丝过滤法。
3、检出缺陷型:方法有
1)夹层培养法:图8-23。
2)限量补充培养法:含微量蛋白胨(0.01%)的[一]上。
3)逐个检出法:分别接种到[—]和[+]上。
4)影印接种法:[+]培养,影印至[—]上。
4、鉴定缺陷型:
1)生长谱法:缺陷型斜面培养后,制成菌悬液涂布于[—]上,平板上划成不同区域,分别加上一种所需测验的营养物,培养观察。
2)组合补充培养基法:菌株较多时用。
营养缺陷型应用
1、标记菌种:代谢途径、杂交、基因重组中。
2、生物测定用菌
3、生产菌株:前体积累。

(五)抗性突变株筛选
1、一次性筛选:在对于出发菌株完全致死的环境中一次性筛选少数抗性突变株。
2、阶梯性筛选:使用浓度梯度与某一空间或时间。
空间—梯度培养皿法:图8-18。
时间—类似于驯化。
4节:基因重组与杂交育种
杂交hybridization:两个性状不同的菌株或变种之间进行细胞结合,遗传物质交换重新组合成新的性状。
基因重组gene recombination:两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起,经过遗传分子的重新组合后,形成新遗传型个体的方式。
二者关系
一、原核微生物的基因重组
(一)转化 transformation
概念:受体菌直接吸收了来自供体菌的DNA片段,通过交换,把它组合到自己的基因组中,从而获得供体菌部分遗传性状的现象。
转化后的受体菌,称转化子transformant
DNA—转化因子。
条件:
1、能进行转化的细胞必须是感受态的。即受体菌最易接收外源DNA片段并实现转化的生理状态。
2、DNA一般都是线状双链DNA,不小于5×105D,转化的片段小于107D,平均含15个基因。
转化频率较低,一般0.1~1%。
过程:图8-25
双链DNA结合→酶促分解、形成片段→一条单链降解,一条进入→同源配对、受体相应段切除,交换,杂种DNA→复制、分离、转化子。
图8-26
转化育种:DNA提取,感受态细胞培养和转化。
转染:把噬菌体或其他病毒DNA(RNA)提取出来,用它去感染感受态的宿主细胞,并产生正常噬菌体或病毒后代。
(二)转导transction
概念:通过缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象。
U型管实验:两株营养缺陷型LA-22(try-),溶源性细菌(受体);LA-2(his-),敏感菌(供体);温和性噬菌体P22。结果在LA-22端出现原养型his+try+。原因?
1、普遍转导
噬菌体可误包裹供体菌中任何基因(包括染色体外遗传物质),并使受体菌实现各种性状的转导。
1)完全普遍转导:
噬菌体误包入供体菌DNA片段,形成完全不含本身DNA的假噬菌体(一种完全缺陷噬菌体),感染受体菌后,受体不会溶源化,也不会裂解。导入的DNA片段与同源区配对,通过两次交换而重组到受体菌DNA上,形成稳定转导子。
2)流产普遍转导
在获得供体菌DNA片段的受体菌内,如果转导的DNA不能进行重组和复制,其上的基因仅经过转录而得到表达。
此外源DNA能够保持下去,任何时候只有一个细胞含有它。表型上仍 出现供体菌特征,能在选择性培养基上形成微小菌落。
2、局限转导
通过某些部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中的转导现象。
产生机制:不正常切割 图8-30
温和噬菌体整合到细菌DNA特定位点上,诱导裂解时,在插入位点两侧的少数宿主基因会因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上,一起包入噬菌体中,形成部分缺陷噬菌体,无正常噬菌体的溶源性和增殖能力。
Compbell模型
(1)低频转导(LFT)
E. coli k12的 phage 成熟时,产生转导噬菌体(  dgal) 频率为10-4--10-6 ,称低频转导。LFT 裂解物在低moi 下感染宿主,可得极少量局限转导子。
 dgal— 带有半乳糖基因的 缺陷噬菌体。
(2)高频转导(HFT)
E. coli gal-受体菌用高moi的LFT裂解物进行感染时,则凡感染有 dgal 的 细胞,几乎同时感染有正常 。
两种噬菌体可同时整合到受体菌DNA 上,使其成为双重溶源菌 ,诱导裂解时,正常 可补偿 dgal 所 缺失基因功能,两个噬菌体同时复制,产生裂解物中,大体上含等量 和 dgal。 用低moi 的HFT 裂解物感染宿主,可高频率转导。
3、溶源转变 lysogenic conversion
当温和噬菌体感染其宿主而使之发生溶源化时,因噬菌体基因整合到宿主基因上,而使后者获得了除免疫性以外新性状的现象,称溶源转变。
与转导本质上不同,噬菌体不携带任何供体菌基因,是完整的,而非缺陷的。
普遍转导与局限转导比较(插入)
(三)接合conjugation
概念:通过供体菌和受体菌完整细胞间的直接接触而传递大段DNA的过程。也称杂交。
基本原理:
细菌、放线菌中都存在接合现象。放线菌中天蓝色链霉菌( Streptomyces coelicolor)研究的最为详细。细菌中,大肠杆菌研究最清楚。
F+ + F- = F+
F因子传递过程—滚环模型:
Hfr + F- = F-
与F-接合时, Hfr染色体在F因子处发生断裂,环状变成线状,转移至 F- 约100分钟,F因子最后转移。转移过程中经常会发生断裂,所以重组频率高,但很少出现F+ 。
转移过程与F因子传递过程基本相同,但进入F- 的单链DNA经双链化后,形成部分合子,然后同源配对,经过两次或以上的交换才能发生重组。
中断杂交实验
Hfr染色体转移有严格的顺序性,实验中可每隔一定时间利用强烈搅拌等措施,中断接合,从而获得呈现不同数量Hfr性状的F- 接合子。
根据在F- 中出现Hfr各种性状的时间早晚,可以画出一幅较完整的环状染色体图。
F` 菌株—Hfr菌株的F因子因不正常切割而脱离染色体时,可形成游离的但带有一小段染色体基因的F因子,称为F`因子。
此带有F`因子的菌株—初生F`菌株。
初生F`+ F- =F`(次生F`菌株)
既获得了F因子,又获得了来自初生F`菌株的若干遗传性状,以这种接合来传递供体菌基因的方式,称F因子转导。(F—ction)
次生F`菌株中,一部分F因子可重新整合到染色体上,恢复成Hfr菌株。
接合育种
育种前所选择的亲本必须具有一定的选择性标记,还必须具有F因子,受体菌无F因子,但必须为F因子可亲和。
1、菌株准备
2、杂交
3、重组体检出
(四)原生质体融合 Protoplast Fusion
通过人为方法,使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合,并产生重组子的过程,又称细胞融合。

一、特点
1、杂交频率高
2、受接合型或致育性限制较少,但与亲缘性有一定关系。
3、遗传物质传递更完整。
4、存在两株以上亲株同时参与融合可能。
5、可以采用产量性状较高菌株作融合

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